探讨刺茎楤木根皮的抗炎镇痛作用(一)
1 材料与仪器
1.1 试剂和仪器
二甲苯为北京化学试剂厂生产;阿司匹林为南京第二制药厂生产;角叉菜胶(Carraseenan)为Sigma产品;氢化可的松为江西国药厂生产。TG328A型电子分析天平;RE-52型旋转蒸发器;TDL-5型低速台式离心机;DL-50型超级恒温器,GJ-8402型热板测痛仪。
1.2 动物
SD大鼠70只,体重(130.0±21.0)g,昆明种小鼠120只,体重(20.0±2.1)g,♂♀兼用,由同济医科大学实验动物中心提供。
1.3 刺茎楤木根皮提取物的制备
刺茎楤木根皮购自恩施州中药材公司。刺茎楤木根皮水提液:取刺茎楤木根皮,用水煎煮3次,过滤后,浓缩成1 g/ml的溶液,即得,以下简称水提液;刺茎楤木根皮醇提液:取刺茎楤木根皮粗粉,乙醇回流提取3次,除去乙醇以后制成1 g/ml的醇提取液,以下简称醇提液,水提液和醇提液均由本院中药制剂实验室制备。
2 方法
2.1 二甲苯致小鼠耳肿廓胀实验[3]
昆明种小鼠40只,随机分为4组,给药组分别ig水煎液25,50 ml/kg,阳性药组ig阿司匹林0.2 g/㎏,对照组ig等量生理盐水,1次/d,连续给药3 d,在末次给药1 h后,以50 μl二甲苯涂于小鼠右耳廓两面致炎,左耳廓作为对照,4 h后,剪下两耳,用直径6 mm打孔器取耳片,称重,以两耳重量差表示炎症反应的强度,计算抑制率。抑制率(%)=[1-(给药组两耳片重量差/空白组两耳片重量差)]×**。
2.2 角叉菜胶致大鼠足肿胀实验[4]
SD大鼠30只随机分成3组,用足容积测量器测量大鼠右后肢踝关节以下容积。给药组分别ip醇提液4 g/kg和2 g/kg,空白对照组ip等量生理盐水,给药30 min后,将1%角叉菜胶溶液0.1 ml注入右后肢脚掌皮下,记录致炎前后不同时间右后肢踝关节以下容积。肿胀率(%)= 致炎前后足跖容量之差/致炎前的足跖容积×**,抑制率(%)= 空白组与给药组平均肿胀率之差/空白组平均肿胀率×**。
2.3 大鼠棉球肉芽肿实验[4,5]
SD大鼠40只,随机分为4组,在乙醚浅麻醉下,将称重无菌棉球分别埋藏于大鼠双侧背部皮下,左右各一个,手术次日给药组分别ip醇提液4 g/kg和2 g/kg,阳性药组ip氢化可的松2.5 mg/kg,空白对照组ip等量生理盐水,1次/d,连续5 d,第6天将大鼠处死,取出无菌棉球及肉芽组织,于60℃烤箱内干燥后称重,计算肉芽组织重量[用带肉芽的棉球重量,减去原棉球重量,即为肉芽组织重量]及抑制率(%)=[1-(给药组肉芽组织干重/空白组肉芽组织干重)]×**。
2.4 小鼠热板法致痛实验[5,6]
选用雄性健康小鼠,放入(55±1.0)℃热板测痛仪上,实验室温度控制在(19±2)℃。观察小鼠出现舔足的潜伏期,作为痛阈指标,选择痛阈在5~20 s的小鼠40只,随机分为4组,给药组分别灌胃水煎液15 ml/kg和30 ml/kg,阳性药组灌胃阿司匹林0.2 g/kg,对照组灌胃等量生理盐水,分别记录给药前和1次性给药后30,60,90 min出现舔足的潜伏期。
2.5 小鼠醋酸致痛扭体法实验[5,6]
取健康小鼠40只,雌雄各半,随机分成4组,给药组分别灌胃水煎液15 ml/kg和30 ml/kg,阳性药灌胃阿司匹林0.2 g/kg,对照组灌胃等量生理盐水,1次性给药30 min后,各组均腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 ml,观察30 min内小鼠扭体反应次数,求得扭体反应抑制率。抑制率(%)=[1-( 给药组扭体反应次数/空白组扭体反应次数)]×**。
2.6 统计学处理
应用SPSS10.0 for Windows统计分析软件进行处理,实验数据以±s表示,实验结果采用配对样本t检验。
3 结果
3.1 刺茎楤木根皮对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
结果见表1。刺茎楤木根皮水煎液组(50 ml/kg·d)与生理盐水组比较两耳重量差有统计学意义(P<0.05),阿司匹林组与生理盐水组比较两耳重量差有统计学意义(P<0.01)。刺茎楤木根皮水煎液组(25 ml/kg·d)与生理盐水组比较两耳重量差无统计学意义。结果表明刺茎楤木根皮对二甲苯引起的耳廓肿胀有明显的抑制作用。表1 刺茎楤木根皮对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(略)
3.2 刺茎楤木根皮对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响
责任编辑:小季 WWW.1168.TV 2010-5-8 18:20:32