探讨黄精提取物对小鼠低氧/复氧损伤的保护作用
黄精为百合科黄柏属多种植物的干燥根茎，具补肾、滋阴润燥之功，用于滋补强身和治疗肾虚精亏、肺虚燥咳以及脾胃虚弱之症［1］，已有很长历史，是中医常用药物之一。生长在湖北恩施富硒（恩施是我国的高硒区）深山丛林中的黄精，由于其富硒而使药效独特，疗效显著。本实验以小鼠为研究对象，建立低氧/复氧损伤的模型，主要研究黄精提取物对小鼠低氧/复氧损伤的保护作用，为黄精的临床应用和进一步研究开发提供理论依据和参考。
1 材料
1.1 药材黄精购于恩施中药材公司，采用双道束原子荧光光谱法测定硒的含量为0.58 μg/g。
1.2 动物昆明种小鼠30只，体重18～22 g， ♂♀兼用，由同济医科大学实验动物中心提供。
1.3 试剂活性氧（ROS）测定试剂盒、超氧化物歧化酶（SOD）测定试剂盒、丙二醛（MDA）测定试剂盒、酸性磷酸酶（ACP）测定试剂盒、过氧化氢酶（CAT）测定试剂盒均为南京建成生物研究所产品，氯胺酮( Ketamine)为美国Sigma公司产品。化学试剂均为分析纯。
1.4 供试药液的制备取适量富硒黄精根茎粗粉，用水煎煮3次，滤过后，浓缩成0.5 g/ml的溶液，搅拌下加入乙醇至含醇量达70%，低温放置过夜，滤过，回收乙醇，再滤过浓缩制成1 g/ml的水溶液，115℃灭菌45 min，备用，以下简称提取物。
1.5 仪器
TG328A型电子分析天平；RE-52型旋转蒸发器；DL-50型超级恒温器；756MC型紫外可见光分光光度计；GL-20G高速冷冻离心机。
2 方法和结果
昆明种小鼠30只，随机分为3组，富硒黄精提取物组ig提取液20 ml/kg，对照组ig等量生理盐水，自由摄食饮水，连续给药5周。实验前30 min阳性药组ip氯胺酮0.08 g/kg，将小鼠放入钠石灰瓶（150 ml广口瓶，10 g钠石灰）中，每瓶放1只，塞紧瓶塞，8 min后取出，自由呼吸8 min后［2］，将小鼠断头取血，放入带盖的肝素化试管中，立即盖紧，按试剂盒说明书测ROS，CAT，SOD，MDA和ACP各项指数，进行统计学处理后结果见表1～2。表1 黄精提取物对小鼠ROS和CAT的影响(略)表2 黄精提取物对小鼠SOD，MDA和ACP的影响 (略)
结果表明：富硒黄精和氯胺酮均能降低ROS，且氯胺酮的作用显著强于富硒黄精；富硒黄精能增加SOD，CAT活性，氯胺酮能降低SOD活性，但对CAT活性影响无统计学意义，富硒黄精与氯胺酮均能减少MDA，但两者作用的差别无统计学意义，富硒黄精与氯胺酮对ACP影响均无统计学意义。
3 讨论
小鼠经低氧/复氧应激刺激后有大量氧自由基产生，它通过与不饱和脂肪酸作用引发脂质过氧化反应生成MDA，氧自由基及MDA通过多种途径造成细胞膜及亚细胞器膜结构破坏，导致损伤［3］。实验结果表明，富硒黄精对小鼠低氧/复氧脂质过氧化损伤有保护作用，谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px是一种重要的抗氧化酶，硒是GSH-Px的活性成分之一，富硒黄精根茎中富含硒，可以提高GSH-Px活力，从而对细胞产生保护作用；SOD是一种内源性自由基清除剂，本实验结果表明富硒黄精能增加SOD及CAT活性即达到保护作用。氯胺酮能降低ROS及MDA，且降低ROS的作用明显强于富硒黄精组，表明富硒黄精在小鼠低氧/复氧脂质过氧化损伤方面的保护作用比氯胺酮要温和一些，对低氧/复氧脂质过氧化损伤均有保护作用。
责任编辑：小季 WWW.1168.TV 2010-5-8 18:14:52
1 材料
1.1 药材黄精购于恩施中药材公司，采用双道束原子荧光光谱法测定硒的含量为0.58 μg/g。
1.2 动物昆明种小鼠30只，体重18～22 g， ♂♀兼用，由同济医科大学实验动物中心提供。
1.3 试剂活性氧（ROS）测定试剂盒、超氧化物歧化酶（SOD）测定试剂盒、丙二醛（MDA）测定试剂盒、酸性磷酸酶（ACP）测定试剂盒、过氧化氢酶（CAT）测定试剂盒均为南京建成生物研究所产品，氯胺酮( Ketamine)为美国Sigma公司产品。化学试剂均为分析纯。
1.4 供试药液的制备取适量富硒黄精根茎粗粉，用水煎煮3次，滤过后，浓缩成0.5 g/ml的溶液，搅拌下加入乙醇至含醇量达70%，低温放置过夜，滤过，回收乙醇，再滤过浓缩制成1 g/ml的水溶液，115℃灭菌45 min，备用，以下简称提取物。
1.5 仪器
TG328A型电子分析天平；RE-52型旋转蒸发器；DL-50型超级恒温器；756MC型紫外可见光分光光度计；GL-20G高速冷冻离心机。
2 方法和结果
昆明种小鼠30只，随机分为3组，富硒黄精提取物组ig提取液20 ml/kg，对照组ig等量生理盐水，自由摄食饮水，连续给药5周。实验前30 min阳性药组ip氯胺酮0.08 g/kg，将小鼠放入钠石灰瓶（150 ml广口瓶，10 g钠石灰）中，每瓶放1只，塞紧瓶塞，8 min后取出，自由呼吸8 min后［2］，将小鼠断头取血，放入带盖的肝素化试管中，立即盖紧，按试剂盒说明书测ROS，CAT，SOD，MDA和ACP各项指数，进行统计学处理后结果见表1～2。表1 黄精提取物对小鼠ROS和CAT的影响(略)表2 黄精提取物对小鼠SOD，MDA和ACP的影响 (略)
结果表明：富硒黄精和氯胺酮均能降低ROS，且氯胺酮的作用显著强于富硒黄精；富硒黄精能增加SOD，CAT活性，氯胺酮能降低SOD活性，但对CAT活性影响无统计学意义，富硒黄精与氯胺酮均能减少MDA，但两者作用的差别无统计学意义，富硒黄精与氯胺酮对ACP影响均无统计学意义。
3 讨论
小鼠经低氧/复氧应激刺激后有大量氧自由基产生，它通过与不饱和脂肪酸作用引发脂质过氧化反应生成MDA，氧自由基及MDA通过多种途径造成细胞膜及亚细胞器膜结构破坏，导致损伤［3］。实验结果表明，富硒黄精对小鼠低氧/复氧脂质过氧化损伤有保护作用，谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px是一种重要的抗氧化酶，硒是GSH-Px的活性成分之一，富硒黄精根茎中富含硒，可以提高GSH-Px活力，从而对细胞产生保护作用；SOD是一种内源性自由基清除剂，本实验结果表明富硒黄精能增加SOD及CAT活性即达到保护作用。氯胺酮能降低ROS及MDA，且降低ROS的作用明显强于富硒黄精组，表明富硒黄精在小鼠低氧/复氧脂质过氧化损伤方面的保护作用比氯胺酮要温和一些，对低氧/复氧脂质过氧化损伤均有保护作用。
责任编辑：小季 WWW.1168.TV 2010-5-8 18:14:52