研究国产加拿大一枝黄花的药理作用（一）
加拿大一枝黄花Solidago canadensis L.为菊科(Compositae)一枝黄花属(Solidago) 植物，作为泌尿疾病和消炎镇痛治疗药，在欧洲已有几百年药用历史［1］，为《欧洲药典》收录的常用植物药。现代研究证实，欧美等地产加拿大一枝黄花富含黄酮、皂苷及二萜类等化合物，具有抗炎镇痛、解痉、利尿、抗氧化等广泛药理活性［2］，在临床上广泛使用。本种1935年作为观赏花卉被引入我国，20世纪80年代扩散蔓延为杂草，于近年在我国华东、华北、华南等地大面积爆发性生长，对我国生态造成了严重威胁［3］。目前国内对国产加拿大一枝黄花的研究多集中在生物学特性及生态防治方面，化学成分和药理作用方面仅见有挥发油成分和黄酮类，以及抗菌抗氧化活性的报道［4，5］，其体内活性及毒性研究未见报道。我们**对其镇痛、镇咳、祛痰作用、急性毒性进行了研究。现将结果报道如下。
1 器材
1.1 动物清洁级昆明种小鼠，体重（20±2）g，雌雄兼用，由中科院上海实验动物中心提供（动物合格证号： SC XK 沪 2003-0003）。
1.2 药物加拿大一枝黄花，200409采于上海，由上海交通大学药学院李晓波教授鉴定。干燥全草粉碎过40 目筛，95%乙醇渗漉提取，回收乙醇后得提取物，干燥备用。
1.3 试剂吲哚美辛片，上海辛帕斯制药有限公司，批号 050601；阿司匹林片，上海信谊百路达药业有限公司，批号 0554010；盐酸依普拉酮片，上海衡山制药有限公司，批号 040201；氨水，分析纯，国药集团化学试剂有限公司，批号 050120；其他试剂均为国产分析纯。
1.4 仪器YLS-6A 智能热板仪，山东省医学科学研究院设备站；754型紫外分光光度计，上海精密科学仪器有限公司。
1.5 统计软件SPSS 11.5，进行One-Way ANOVA检验。
2 方法
2.1 镇痛作用研究［6］
2.1.1 对热刺激小鼠痛阈值的影响将健康雌性小鼠置于(55±0.5) ℃ 热板仪上, 以小鼠舔后足反应的潜伏期为痛阈指标, 记录小鼠痛阈值，剔除痛阈值小于5 s或大于30 s或跳跃的小鼠, 取预选合格的小鼠间隔5 min再重新测定痛阈值一次，取两次痛阈值的平均值作为该鼠给药前的平均痛阈值。将符合标准的40只小鼠随机分为蒸馏水组、吲哚美辛组（50 mg/kg）、加拿大一枝黄花低剂量组（相当于生药2 g/kg）、加拿大一枝黄花高剂量组（相当于生药6 g/kg）4组。灌胃给药，观察并记录给药后30，60，90，120 min 的痛阈值，痛阈值大于60 s的以60 s计。
2.1.2 对醋酸致小鼠扭体反应的影响健康小鼠 40 只，雌雄各半，随机分为蒸馏水组、阿司匹林组（200 mg/kg）、加拿大一枝黄花低剂量组（相当于生药2 g/kg）、加拿大一枝黄花高剂量组（相当于生药6 g/kg）4组。灌胃给药30 min 后，腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 ml/只，观察并记录小鼠**扭体时间和15 min内小鼠的扭体次数。按下式计算镇痛率：
镇痛率（%）=蒸馏水组扭体次数-试药组扭体次数蒸馏水组扭体次数×**
2.2 镇咳作用研究［6］40 只健康小鼠，雌雄各半。随机分为蒸馏水组、盐酸依普拉酮组（20 mg/kg）、加拿大一枝黄花低剂量组（相当于生药2 g/kg）、加拿大一枝黄花高剂量组（相当于生药6 g/kg）4组。灌胃给药30 min后，将每只小鼠置于自制的引咳装置中，使小鼠接受饱和氨水的喷雾刺激5 s，从喷雾氨水开始计时，以腹肌收缩，张大嘴为准，观察和记录小鼠的咳嗽潜伏期和2 min内咳嗽次数。
2.3 祛痰作用研究［7］健康小鼠40 只，雌雄各半。随机分为蒸馏水组、氯化铵组（2 g/kg）、加拿大一枝黄花低剂量组（相当于生药2 g/kg）、加拿大一枝黄花高剂量组（相当于生药6 g/kg）4组。。每只小鼠灌胃给药30 min 后，腹腔注射5%酚红生理盐水溶液10 ml/kg，30 min后脱臼处死，剥离气管周围组织，剪下自甲状软骨至气管分支处的一段气管，放入盛有1 ml蒸馏水的试管中，再加入1 mol/L氢氧化钠溶液0.1 ml，以1 ml蒸馏水/0.1 ml氢氧化钠溶液为空白， 546 nm处测量溶液的吸光度，以吸光度A作为评价指标。
2.4 急性毒性实验［6］LD50的测定：健康小鼠30 只，雌雄各半，按体重随机分为5组，每组6只，实验前禁食12 h，可自由饮水；灌胃给药，剂量分别为：0.1，0.5，2.5，12.5，62.5 g/kg，连续观察7 d，每天记录小鼠体重及死亡数目，并观察小鼠反应情况。*大耐受量实验：健康小鼠20 只，雌雄各半，按体重随机分为蒸馏水组、加拿大一枝黄花组（81.0 g/kg），实验前禁食12 h，可自由饮水；灌胃给药，连续观察7 d，每天记录小鼠体重及死亡数目，并观察小鼠反应情况。7 d后处死全部小鼠，肉眼观察心、肝、脾、肺、肾等脏器的变化。
责任编辑：小季 WWW.1168.TV 2010-5-8 18:31:25
1 器材
1.1 动物清洁级昆明种小鼠，体重（20±2）g，雌雄兼用，由中科院上海实验动物中心提供（动物合格证号： SC XK 沪 2003-0003）。
1.2 药物加拿大一枝黄花，200409采于上海，由上海交通大学药学院李晓波教授鉴定。干燥全草粉碎过40 目筛，95%乙醇渗漉提取，回收乙醇后得提取物，干燥备用。
1.3 试剂吲哚美辛片，上海辛帕斯制药有限公司，批号 050601；阿司匹林片，上海信谊百路达药业有限公司，批号 0554010；盐酸依普拉酮片，上海衡山制药有限公司，批号 040201；氨水，分析纯，国药集团化学试剂有限公司，批号 050120；其他试剂均为国产分析纯。
1.4 仪器YLS-6A 智能热板仪，山东省医学科学研究院设备站；754型紫外分光光度计，上海精密科学仪器有限公司。
1.5 统计软件SPSS 11.5，进行One-Way ANOVA检验。
2 方法
2.1 镇痛作用研究［6］
2.1.1 对热刺激小鼠痛阈值的影响将健康雌性小鼠置于(55±0.5) ℃ 热板仪上, 以小鼠舔后足反应的潜伏期为痛阈指标, 记录小鼠痛阈值，剔除痛阈值小于5 s或大于30 s或跳跃的小鼠, 取预选合格的小鼠间隔5 min再重新测定痛阈值一次，取两次痛阈值的平均值作为该鼠给药前的平均痛阈值。将符合标准的40只小鼠随机分为蒸馏水组、吲哚美辛组（50 mg/kg）、加拿大一枝黄花低剂量组（相当于生药2 g/kg）、加拿大一枝黄花高剂量组（相当于生药6 g/kg）4组。灌胃给药，观察并记录给药后30，60，90，120 min 的痛阈值，痛阈值大于60 s的以60 s计。
2.1.2 对醋酸致小鼠扭体反应的影响健康小鼠 40 只，雌雄各半，随机分为蒸馏水组、阿司匹林组（200 mg/kg）、加拿大一枝黄花低剂量组（相当于生药2 g/kg）、加拿大一枝黄花高剂量组（相当于生药6 g/kg）4组。灌胃给药30 min 后，腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 ml/只，观察并记录小鼠**扭体时间和15 min内小鼠的扭体次数。按下式计算镇痛率：
镇痛率（%）=蒸馏水组扭体次数-试药组扭体次数蒸馏水组扭体次数×**
2.2 镇咳作用研究［6］40 只健康小鼠，雌雄各半。随机分为蒸馏水组、盐酸依普拉酮组（20 mg/kg）、加拿大一枝黄花低剂量组（相当于生药2 g/kg）、加拿大一枝黄花高剂量组（相当于生药6 g/kg）4组。灌胃给药30 min后，将每只小鼠置于自制的引咳装置中，使小鼠接受饱和氨水的喷雾刺激5 s，从喷雾氨水开始计时，以腹肌收缩，张大嘴为准，观察和记录小鼠的咳嗽潜伏期和2 min内咳嗽次数。
2.3 祛痰作用研究［7］健康小鼠40 只，雌雄各半。随机分为蒸馏水组、氯化铵组（2 g/kg）、加拿大一枝黄花低剂量组（相当于生药2 g/kg）、加拿大一枝黄花高剂量组（相当于生药6 g/kg）4组。。每只小鼠灌胃给药30 min 后，腹腔注射5%酚红生理盐水溶液10 ml/kg，30 min后脱臼处死，剥离气管周围组织，剪下自甲状软骨至气管分支处的一段气管，放入盛有1 ml蒸馏水的试管中，再加入1 mol/L氢氧化钠溶液0.1 ml，以1 ml蒸馏水/0.1 ml氢氧化钠溶液为空白， 546 nm处测量溶液的吸光度，以吸光度A作为评价指标。
2.4 急性毒性实验［6］LD50的测定：健康小鼠30 只，雌雄各半，按体重随机分为5组，每组6只，实验前禁食12 h，可自由饮水；灌胃给药，剂量分别为：0.1，0.5，2.5，12.5，62.5 g/kg，连续观察7 d，每天记录小鼠体重及死亡数目，并观察小鼠反应情况。*大耐受量实验：健康小鼠20 只，雌雄各半，按体重随机分为蒸馏水组、加拿大一枝黄花组（81.0 g/kg），实验前禁食12 h，可自由饮水；灌胃给药，连续观察7 d，每天记录小鼠体重及死亡数目，并观察小鼠反应情况。7 d后处死全部小鼠，肉眼观察心、肝、脾、肺、肾等脏器的变化。
责任编辑：小季 WWW.1168.TV 2010-5-8 18:31:25